RIPA裂解液
外觀
RIPA裂解液(英語:Radioimmunoprecipitation assay buffer,全稱放射免疫沉澱法緩衝液)是一種用於裂解細胞或組織的裂解緩衝液,常用於放射性免疫沉澱分析(RIPA)[1][2]。此緩衝液的變性性能比NP-40裂解液或曲拉通X-100裂解緩衝液更強,因為它包含離子型去垢劑SDS和脫氧膽酸鈉作為破壞核膜,提取核內物質的活性成分。RIPA緩衝液在實驗時能提供低的背景,但也會使激酶變性。
配方
[編輯]用於提取總蛋白質的RIPA緩衝液配方如下:
- 25mM Tris (也可以用10mM 磷酸緩衝液來代替)pH值為7-8
- 150mM 氯化鈉
- 0.1% SDS(可選)
- 0.5%的 脫氧膽酸鈉
- 1%的Triton X-100或 NP-40
- 蛋白酶抑制劑,例如苯甲基磺醯氟(PMSF)或其它蛋白酶抑制劑(根據試劑商提供的說明使用)。
參考文獻
[編輯]- ^ Comparison of a radioimmunoprecipitation assay to immunoblotting and ELISA for detection of antibody to African swine fever virus. J. Vet. Diagn. Invest. July 1990, 2 (3): 191–6 [2017-05-25]. PMID 2094444. doi:10.1177/104063879000200307. (原始內容存檔於2016-08-04).
- ^ Ngoka LC. Sample prep for proteomics of breast cancer: proteomics and gene ontology reveal dramatic differences in protein solubilization preferences of radioimmunoprecipitation assay and urea lysis buffers. Proteome Sci. October 2008, 6 (1): 30. PMC 2600628
. PMID 18950484. doi:10.1186/1477-5956-6-30.