非洲爪蟾卵母細胞表達技術

Xenopus laevis

非洲爪蟾卵母細胞表達系統（Xenopus laevis oocyte expression system）是一種被廣泛應用的異源蛋白表達平台，用於研究離子通道蛋白、受體蛋白、轉運蛋白等的功能。這項技術通過顯微注射法將目的基因的mRNA或cRNA注射進非洲爪蟾（Xenopus laevis）雌性個體的卵母細胞中。非洲爪蟾細胞具有體積大（直徑約1~1.3 mm）、穩定性好、易於進行注射操作，以及其背景離子通道較少等特點，非常適合進行電生理和功能研究。

爪蟾卵母細胞除了具有以上提及的特點外，還擁有方便製取、存活時間長等優點，同時爪蟾卵母細胞還可以與多種實驗手段聯合使用，如TEVC（兩電極電壓鉗技術）、CO-IP（蛋白質免疫共沉澱）等。因此經常被用來選用作為模式細胞。

原理

該技術的基本思想是將目標基因的mRNA或cRNA（合成RNA）注射到卵母細胞中，讓它們在細胞內翻譯成目標蛋白，之後對這些蛋白進行功能分析（如電生理測定、蛋白定位、激活響應等）。

非洲爪蟾卵母細胞螢光顯微圖像

應用場景

該系統目前在植物科學領域被廣泛應用於探究離子通道蛋白的形成機制，如在一篇題為《A wheat tandem kinase and NLR pair confers resistance to multiple fungal pathogens》的研究論文中，研究者利用該技術研究一種非典型的NLR蛋白WTN1在與串聯激酶WTK3發生互作後在細胞膜上形成鈣離子通道。