微分相位對比
外觀
微分相位對比(Differential Phase Contrast, DPC)是一種基於不對稱照明的光學顯微技術,通過檢測樣品的相位梯度信息,生成高對比度的邊元增強圖像。該技術無需化學染色即可觀測透明或低對比樣品,廣泛應用於生物醫學與材料科學領域。
技術原理
[編輯]基本概念
[編輯]DPC利用不對稱照明(如單側光源)檢測樣品的相位梯度,其數學模型可表示為: 其中為相位延遲,為照明方向向量。[1]
與其他技術的比較
[編輯]特性 | DPC(微分相位對比) | DIC(微分干涉對比) | iDPC(整合微分相位對比) |
---|---|---|---|
成像目標 | 相位梯度(邊緣增強) | 相位梯度(邊緣增強) | 絕對相位分布 |
數據來源 | 單一方向照明 | 物理棱鏡分光 | 多方向照明積分 |
圖像效果 | 邊緣清晰,相位不完整 | 邊緣清晰,相位不完整 | 完整相位分布,細節保留 |
應用場景 | 快速表面形貌觀察 | 高分辨率表面形貌觀察 | 透明樣本定量分析 |
發展歷史
[編輯]- 1984年:David K. Hamilton與Colin J. R. Sheppard首次提出DPC技術,應用於掃描光學顯微鏡。[1]
- 2000年代:DPC被引入寬場顯微鏡,用於活細胞成像。[2]
- 2010年代:結合計算成像算法,DPC的分辨率與對比度進一步提升。[3]
應用領域
[編輯]生物醫學
[編輯]- 活細胞成像:觀測細胞邊緣與內部結構,無需染色。[4]
- 組織病理學:快速篩查病理切片中的異常細胞。
材料科學
[編輯]- 表面形貌分析:測量薄膜與塗層的表面粗糙度。[5]
- 半導體檢測:定位集成電路的奈米級缺陷。
技術優勢與限制
[編輯]優勢 | 限制 |
---|---|
• 無需標記,避免光毒性 • 快速成像,適合動態觀測 • 兼容常規顯微鏡升級 |
• 僅檢測相位梯度,無法重建絕對相位 • 對厚樣品(>20μm)成像效果較差 • 光源不對稱性影響圖像均勻性 |
參見
[編輯]參考文獻
[編輯]- ^ 1.0 1.1 Hamilton, D. K.; Sheppard, C. J. R. Differential phase contrast in scanning optical microscopy. Journal of Microscopy. 1984, 133 (1): 27–39. doi:10.1111/j.1365-2818.1984.tb00460.x.
- ^ Zuo, C.; Chen, Q. High-resolution transport-of-intensity quantitative phase microscopy. Scientific Reports. 2014, 4 (1): 1–8. doi:10.1038/srep03856.
- ^ Tian, L.; Waller, L. Quantitative differential phase contrast imaging in an LED array microscope. Optics Express. 2015, 23 (9): 11394–11403. doi:10.1364/OE.23.011394.
- ^ Chen, M.; Li, Y. Label-free imaging of neuronal dynamics using DPC microscopy. Nature Methods. 2020, 17 (5): 512–520. doi:10.1038/s41592-020-0796-x.
- ^ Smith, J.; Brown, R. Nanoscale surface profiling using DPC microscopy. Advanced Materials. 2019, 31 (45): 1905678. doi:10.1002/adma.201905678.
外部連結
[編輯]- ZEISS DPC技術介紹(官方技術白皮書)
- YouTube上的DPC顯微鏡成像演示