引物
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引物[1][2]（英语：primer）又称引子，是一小段单链核酸（亦可称为寡核苷酸），含游离3′-羟基，并可引发聚合反应。引物可为DNA或RNA，参与DNA复制的起始步骤。DNA复制过程中，由于DNA聚合酶只能将核苷酸接在现有核酸的3'端上，所以必须有一段引物先接合到模板股上，DNA聚合酶才能开始合成互补股[3]。
自然界生物细胞中的DNA复制过程，只会使用RNA引物（RNA primer）；而人工合成，用来参与生物体外的DNA合成过程（包括聚合酶链式反应及DNA测序）之引物，则因为对稳定度的需求，多为DNA引物（DNA primer）。人工合成单链核酸的技术另可应用于制造探针。
设计引物时，有一些必须注意的标准，其中包括引物本身的解链温度（melting temperature, Tm）。解链温度可由引物长度及其中的碱基组成决定。引物越长，解链温度便会较高；而若鸟嘌呤与胞嘧啶的占比较高，亦会因为与模板股之间的氢键数较多，导致更高的解链温度。通常利用一个称为“BLAST”的工具协助引物设计，此工具可指出一段DNA中具有特异性的区域，根据这段序列来设计引物，可降低引物接合到错误位置的可能性。[4]
使用RNA作为引物的合成过程中，在DNA聚合酶将整段DNA复制完成后，RNA引物会被移除，并在空缺位置补上DNA。
参见
[编辑]参考资料
[编辑]- ^ 引物. 术语在线. 全国科学技术名词审定委员会. （简体中文）
- ^ 引子. 乐词网. 国家教育研究院 （中文（台湾））.
- ^ Michael M. Cox; Jennifer Doudna; Michael O'Donnell. Molecular Biology.
- ^ Staff, Behind The Bench. PCR Primer Design Tips. Behind the Bench. 2019-09-25 [2025-07-03] （美国英语）.
外部链接
[编辑]- BLAST https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi
- Primer-BLAST https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/
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